厚朴属木兰科植物，在中药应用中极其广泛。《本草纲目》等书中记载多种厚朴药方，味辛、性温等是厚朴最为明显的主要特征，同时具有行气化湿、退热利尿、温中止痛、降逆平喘的药用功效。
　　微生物发酵是一种古老的技术，随着中医药学的发展，人们开始着手致力于微生物发酵中药，常见的中药发酵包括固体微生物发酵和液体微生物发酵两类。微生物发酵中药不仅对中药药性有提升，而且其抗菌效果在发酵后也会产生影响。
　　本实验通过以厚朴和乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌、植物乳杆菌为实验材料，研究实验菌对厚朴进行发酵，从而确定益生菌发酵后对厚朴抗菌活性的影响，为进一步深入研究中药的应用功效提供理论参考。
　　一、材料与方法
　　（一）材料与设备材料
　　厚朴饮片；大肠埃希菌；沙门氏菌；乙醇；安琪酵母粉等。
　　设备
　　数控超声波清洗器；立式压力蒸汽灭菌锅；恒温箱等。
　　（二）方法
　　药液制备
　　称取厚朴药材粗粉100g，95%乙醇溶液浸泡12h后超声提取30min，减压抽滤，滤液浓缩至1g/mL，置4℃冰箱中保存备用。
　　菌种的活化
　　挑取发酵菌株菌种分别划线接种于YPD和MRS培养基，在（酵母菌28℃、其他菌37℃）连续培养24h，转接至液体培养基，振荡培养至OD600=0.8时，置于4℃冰箱中备用。
　　挑取菌种（大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌）接种于LB培养基，在37℃连续培养12 h后，转移至LB液体培养基中，振荡培养至OD600=0.8时，置于4℃冰箱中备用。
　　益生菌对厚朴的发酵
　　取厚朴粉末适量，将菌种的活化中菌悬液倒入药材表面，摇晃均匀，置于恒温培养箱中发酵至体积变大备用。
　　将发酵后的药材加入95%乙醇溶液，超声提取30min，减压抽滤，滤液浓缩至1g/mL，置4℃冰箱中保存备用。
　　厚朴发酵液抑菌活性测定
　　采用K-B法。取试验菌悬液100μL于LB固体培养基上，均匀涂布。将无菌空白药敏片于未发酵和发酵后的厚朴提取液中分别浸泡30s后贴于培养基表面。37℃倒置培养24h后测量抑菌圈直径。
　　二、实验结果及分析
　　厚朴发酵液抑菌活性测定结果表明：厚朴对四种试验菌均有抑菌效果，经酵母菌、双歧杆菌发酵过的厚朴提取液抑菌效果明显增加。
　　本实验通过益生菌发酵后对厚朴抗菌活性的研究得出，部分益生菌发酵厚朴后能够影响厚朴的抑菌程度，根据不同发酵条件所得出的抑菌程度不一，且对于不同类菌种，抑菌程度也随之改变。当发酵选用的益生菌为酵母菌时，接种量为2%；时间为2d；温度为28℃时，测得对蜡样芽孢杆抑菌效果最优，其抑菌圈直径为14.1mm；接种量为2.5%；时间为1d；温度为28℃时，测得对大肠杆菌抑菌效果最优，其抑菌圈直径为13.1mm。
　  本文系2023年大学生创新创业训练计划项目“益生菌发酵后对厚朴抗菌活性的研究”研究成果（项目编号：S202313123030）